Основная проблема введения васаби в культуру in vitro с помощью корневища заключается в очень высокой вероятности заражения. Дезинфицировать экспланты, не убив их, очень сложно. Поэтому в качестве альтернативы я хочу попытаться получить каллус (недифференцированные клетки) из листьев и черешков, они менее подвержены заражению. Если удастся получить каллус, далее можно попробовать заставить их дифференцироваться в клетки нормального растения.

Суть эксперимента #3 заключается в подборе способа дезинфекции листьев и черешков. В экспериментах #1 и #2 я замачивал в спирте 70% 1 минуту и в гипохлорите натрия 1% 10 минут. Этого оказалось много. Заражения не было, но кусочки почернели. В эксперименте #3 я сделал две группы по 12 кусочков:

• А: спирт 70% 20 сек, затем гипохлорит натрия 1% 3 мин
• B: спирт 70% 40 сек, затем гипохлорит натрия 1% 6 мин

С момента высадки эксплантов в банки прошло 14 дней. Заражение было только у одного кусочка из группы B. По внешнему состоянию кусочки из группы A значительно лучше. В группе B больше темных участков. Так что вариант A планирую дальше использовать для стерилизации листьев и черешков васаби.

В среду для выращивания, в оба варианта, был добавлен фитогормон 2,4-D (2,4-Дихлорфеноксиуксусная кислота), 0.22 мг/л. Уже две недели прошло. Кажется, что мог бы появиться уже каллус. Так что в следующей версии попробую разные концентрации 2,4-D